01什么是內(nèi)毒素？

細菌內(nèi)毒素，又稱為“熱原”，細菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上的特有結(jié)構(gòu)，細菌在存活狀態(tài)時不釋放出來，只有當細菌死亡自溶時才釋放到細胞外，表現(xiàn)多種毒性作用，為區(qū)別于外毒素而稱之為內(nèi)毒素。細菌內(nèi)毒素是由脂多糖（LPS）、蛋白質(zhì)和磷脂組成的高分子量復(fù)合物，發(fā)揮毒性的成分主要為類脂質(zhì)A（Lipid A），類脂A是LPS活性不可缺少的部分, 可視作LPS 的“生物活性中心”。內(nèi)毒素位于細胞壁的最外層、覆蓋于細胞壁的黏肽上。各種細菌的內(nèi)毒素的毒性作用較弱，大致相同，可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性血管內(nèi)凝血等。內(nèi)毒素耐熱而穩(wěn)定，抗原性弱�？纱碳�機體產(chǎn)生抗體，但無中和作用，形成抗毒素，經(jīng)甲醛處理不能成為類毒素。

02內(nèi)毒素的檢測方法有哪些？

20世紀60年代，人們發(fā)現(xiàn)一種古老的海洋生物，被稱為“海洋活化石”的鱟，它的血液與內(nèi)毒素接觸后會發(fā)生特異性的凝集反應(yīng)，人們經(jīng)過大量研究和實驗從它的血液中提取出了用于檢測內(nèi)毒素的“鱟試劑”。內(nèi)毒素檢測單位為EU/ml。

目前內(nèi)毒素測定方法有：

① 凝膠法，將樣本與鱟試劑在試管中混合，并使用干浴器，在37±1°C下，孵育60±2min，期間不要振動。加熱完成后，立即緩慢地將試管傾斜180°。如果凝膠已形成并能保持其完整性而不變形或塌陷，則結(jié)果可確定為陽性，而如果未形成凝膠則為陰性。在檢測期間，對于一系列樣本，要進行多倍稀釋（通常為2倍），以檢查每個樣品的結(jié)果是否為陽性。確定為陽性的最大有效稀釋倍數(shù)或最小濃度被稱為終點。

② 脂多糖（LPS）的生物學標記的探測分析法，雖然此類方法能夠檢測出樣品中LPS的種類并且能敏感地檢測出樣品中LPS的濃度，但是仍然不能準確地檢測出有生物學作用的內(nèi)毒素濃度。

③ 酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），ELISA法是目前新興的內(nèi)毒素檢測方法, 它是基于抗原抗體的酶聯(lián)免疫測定法，由外加熱原質(zhì)刺激巨噬細胞后產(chǎn)生的內(nèi)熱原物質(zhì)如腫瘤壞死（TNF）因子白細胞介素1（IL-1）等而進行測定的。

④ 生物傳感器檢測法，生物傳感器也是目前新興的內(nèi)毒素檢測方法，大部分仍是基于鱟試驗法中鱟阿米巴法溶解產(chǎn)物與內(nèi)毒素的LPS地凝結(jié)反應(yīng)。該類檢測法具有測量速度快、敏感性高、最低檢測限低等特點，目前，國內(nèi)外有較多對生物傳感器檢測內(nèi)毒素的研究。

03內(nèi)毒素檢測的意義有哪些？

細菌內(nèi)毒素具有多種生物學活性，微量的內(nèi)毒素進入機體將會出現(xiàn)發(fā)熱、血壓降低、寒顫、引起DIC、內(nèi)毒素敗血癥等一系列臨床反應(yīng)，因此內(nèi)毒素快速定量檢測，對臨床對癥治療具有很深的現(xiàn)實意義。

① 內(nèi)毒素檢測不僅有助于鑒別是否為細菌感染，尤其是對于革蘭陰性桿菌感染具有重要的參考價值，還能提示感染嚴重程度，可用于發(fā)熱原因的快速輔助診斷。

② 有利于臨床及早診治疾病，為選擇用藥提供一定理論依據(jù)，對病情進行動態(tài)監(jiān)測，對給藥后的療效及預(yù)后判斷具有重大意義。

③ 用于血液透析液的監(jiān)測，對于保證治療效果和患者安全有著重要作用。

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